以电子束为光源,用轴对称的电磁线圈作为透镜来成像,透过样本的电子束经过多个物镜放大后在荧光屏上成像,从而有更高的分辨率和放大倍数;
1. 细胞团或者组织块用2.5%的戊二醛4度避光固定
2. 0.1M磷酸缓冲液(pH7.4)漂洗3次,每次15分钟。
3. 1%的锇酸·0.1M磷酸缓冲液(pH7.4)室温(20℃)固定2小时。
4. 0.1M磷酸缓冲液(pH7.4)漂洗3次,每次15分钟。
5. 脱水:50%-70%-80%-90%-95%-100%-100%酒精上行脱水,每次15分钟。
6. 渗透:丙酮:812包埋剂=1:1混合液渗透过夜,纯812包埋剂渗透过夜。
7. 包埋:60度聚合48h。
8. 切片:60-80nm超薄切片。
9. 染色:铀铅双染色(2%醋酸铀饱和水溶液,枸橼酸铅,各染色15min)切片室温干燥过夜
10.电镜观察。
结果展示: